在SPE小柱的使用过程中有许多老师会疑惑流速问题。在通常的情况下，我们对于正常流速要求是0.5滴到1滴每秒。流速慢，导致实验周期长，流速快，有可能导致回收率不稳定。那么今天我们就来深入讨论一下影响SPE流速因素吧。

原因一：样品制备问题

大多数流速问题产生的原因都是样品制备不充分。比如样品浑浊，离心过滤不充分导致上样时候筛板堵塞，或者是样品本身的蛋白等大分子物质未经过充分的处理，没有进行有效蛋白沉降，导致筛板堵塞。这类原因造成的流速问题可以通过改善前处理手段来解决。所以说样品制备充分是保障SPE正常流速的第yi步。

原因二：小柱本身因素（填料粒径和柱管体积）

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填料粒径的影响

填料粒径大填装越松散，对流动相阻力小，流速越快；粒径越小，填装越紧致，流速越慢。这种现象在弗罗里硅土和硅藻土小柱上表现得很明显。一般小柱填料粒径的范围是40-60um，农残级的弗罗里硅土粒径范围在75-150um，大孔硅藻土小柱600-900um。所以弗罗里硅土和硅藻土小柱的流速会比一般小柱流速快，尤其是大孔硅藻土小柱，使用时需要加上包装中配套的导流针来控制流速。

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柱管体积的影响

对于同种填料的产品，当填料量一定时，使用的柱管体积越小流速越慢。这是因为柱管体积越小，横截面小，填装高度越高，所以流动相阻力会增大，导致流速变慢。所以在实际检测工作中，如果对上样量和上样流速有要求，在不影响固相萃取效果的前提下，可以选择大体积柱管或者高通量的膜片装置，CNW的DISK圆盘上样速度可以达到50ml/min,在处理大规模水样时有明显的流速优势。

原因三：溶剂的选择和使用

溶剂的选择是很多老师在实验过程中容易忽视的点，比如：C18小柱，一般用甲醇活化，如果用水活化，由于C18的疏水性，水的浸润速度会慢于甲醇，导致流速变慢。遇到这种情况，调整活化溶剂就可以解决问题了。

溶剂使用顺序也会影响流速，比如活化溶剂为二氯甲烷，平衡溶剂为水，由于二氯甲烷和水不互溶，所以活化平衡时流速就会很慢。这种情况我们建议在两种不互溶的溶剂之间加入过渡溶剂甲醇，这样就可以解决问题了。

原因四：空气层影响

空气层会阻碍液体的流路从而造成流速问题。筛板或者填料松动是形成空气层的主要原因。商品化的产品经过运输到达用户手中，在运输过程中，填料和筛板间若发生了位移松动，就容易形成空气层。这种空气层有时比较明显，可以看到填料有断层或者细缝。有时这种松动不明显，只能在小柱使用过程中感受到流速上的差异。这种情况下，轻微的松动问题可以通过压实筛板或者施加正负压赶走空气就可以解决了。

除了运输过程可能造成筛板松动，在小柱的SPE洗脱程序中，如果在活化平衡阶段不小心让溶剂走干了，也会使填料中进入空气导致影响流速。这个时候通过加压或者抽真空排走空气就可以解决问题了。

总结下来影响小柱流速的因素主要有以下几个：样品制备，填料粒径和柱管体积，溶剂选择和使用以及空气层的影响。当然还会有一些别的影响因素， 各位老师在实验过程中如果有流速方面问题，可以先排查一下这些因素，也可以联系我们安谱实验哦，我们的热情24小时在线哦~